文章目录

1 材料与方法

1.1 动物

1.2 药物及试剂

1.3 主要仪器

1.4模型复制

1.5分组及给药

1.6 样品采集、处理

1.7 胃黏膜组织病理学观察

1.8 Western

1.9 统计学处理方法

2 结果

2.1 JPHY对GPL大鼠体质量的影响

2.2 JPHY对GPL大鼠胃黏膜组织病理学变化的影响

2.3 JPHY对GPL大鼠胃黏膜组织中PI3K、Akt、HIF-1α、Beclin1、Bcl-2、BAX蛋白表达的影响

3 讨论

文章摘要:目的探讨健脾化瘀解毒方（JPHY）调控PI3K/Akt/HIF-1α通路干预胃癌前病变（GPL）大鼠胃黏膜上皮细胞自噬及凋亡的机制。方法采用200μg·mL^-1N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）自由饮用+隔日禁食法造模28周复制GPL模型。将SD大鼠随机均分为空白组、模型组、维酶素组(270 mg·kg^-1)、JPHY高剂量组(9 g·kg^-1)和JPHY低剂量组(4.5 g·kg^-1),每组18只。第15周起,各给药组大鼠每天灌胃给药(10 mL·kg^-1)1次,连续25周。分别于第18、28和39周,每组随机取6只大鼠,采用HE染色法观察大鼠胃黏膜组织病理学形态变化;Western Blot法测定胃黏膜组织PI3K、Akt、HIF-1α、Beclin1、Bcl-2、BAX蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜组织固有腺变薄,非固有腺锯齿样变,弥漫性细胞空泡样变,固有腺细胞变为体积小、胞质少、核质比例大、深染的异型增生细胞,呈假复层、跨腺腔灶状分布,有炎性细胞浸润,表现为以肠上皮化生为主;第18周,大鼠胃黏膜组织的PI3K、Akt蛋白表达明显下调（P <0.05,P <0.01）,HIF-1α、Beclin1、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调（P <0.05,P <0.01）;第28周,PI3K、Akt、BAX蛋白表达明显下调（P <0.05,P <0.01）,HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调（P <0.01）;第39周,Akt蛋白表达明显下调（P <0.05）,HIF-1α、Beclin1、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调（P <0.05,P <0.01）,PI3K、BAX蛋白表达差异无统计学意义（P> 0.05）。与模型组比较,JPHY高剂量组的胃黏膜改善作用最明显,异型增生细胞数量、分布范围和分布密度有明显减少,固有层厚度明显增加,腺腔结构趋于正常;第18周的PI3K、Akt蛋白表达明显上调（P <0.01）,HIF-1α、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显下调（P <0.05）;第28周的PI3K、Akt、BAX蛋白表达明显上调（P <0.05,P <0.01）,HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值表达明显下调（P <0.01）;第39周Akt蛋白表达明显上调（P <0.01）,HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显下调（P <0.05,P <0.01）。结论 JPHY对GPL不同阶段的黏膜损伤均有明显保护作用,可能与其通过PI3K/Akt/HIF-1α通路调节肿瘤缺氧微环境以及调控细胞自噬、凋亡作用有关。

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