文章目录

材料和方法

1．实验动物及实验仪器

2．构建C57BL/6 J小鼠HIBD模型

3．脑组织大体观察

4．激光散斑脑血流成像

5.2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色

6.HE染色

7.Fluoro-Jade B染色

8．体重称量

9．统计学处理

结果

1．脑组织大体观察判断HIBD后脑损伤程度

2.TTC染色观察HIBD后脑损伤程度

3．激光散斑血流成像观察HIBD后脑血流的变化

4.HE染色观察HIBD后脑组织病理学变化

5.FJB染色观察HIBD后不同脑损伤程度神经元的损伤

6.HIBD前后小鼠的体重变化

7.HIBD后不同损伤程度所占比例

讨论

文章摘要:目的探讨早期活体区分缺氧-缺血性脑损伤（HIBD）程度的方法,为后续研究不同程度HIBD的分子机制奠定基础。方法采用改良Rice-Vannucci法构建C57BL/6 J小鼠HIBD模型。模型建立后1 d和3 d经活体剪开小鼠头皮行脑组织大体观察,区分轻重损伤。其后运用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色、激光散斑脑血流成像、HE染色、Fluoro-Jade B（FJB）染色及术前、术后体重差,验证活体观察脑损伤程度的可靠性。结果HIBD后1 d和3 d经活体剪开小鼠头皮行脑组织大体观察,可将其区分为轻度损伤（HI-M）组和重度损伤（HI-S）组。HI-S组损伤侧出现明显的梗死灶,脑血流量显著减少,大量神经元坏死,体重较术前显著降低。HI-M组损伤侧脑血流量仅在HIBD后3 d减少,形态学观察到损伤侧皮层和海马区神经元排列疏松,体重较术前降低。结论剪开头皮行脑组织大体观察是早期活体情况下区分HIBD轻度及重度脑损伤的可靠方法。

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