文章目录

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 主要试剂

1.3 实验方法

    1.3.1 动物分组与NEC模型建立

    1.3.2 一般情况观察

    1.3.3 组织取材

    1.3.4 肠道组织HE染色

    1.3.5 脑组织Nissl染色

    1.3.6 荧光定量PCR检测脑组织炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平

    1.3.7 ELISA检测脑组织炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白的表达水平

    1.3.8 免疫荧光检测活化的小胶质细胞和星形胶质细胞数量

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 NEC小鼠的一般情况

2.2 NEC小鼠肠组织的大体形态和病理学改变

2.3 NEC小鼠脑组织海马区的神经细胞缺失

2.4 NEC小鼠脑组织炎症因子的表达水平增加

2.5 NEC小鼠脑组织海马区活化的小胶质细胞和星形胶质细胞增加

3 讨论

文章摘要:目的探讨不同程度坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis, NEC)对新生小鼠脑损伤的影响。方法将60只5日龄C57BL/6小鼠随机分为对照组(CON组,n=20)和坏死性小肠结肠炎组(NEC组,n=40)。CON组与母鼠同笼,母乳喂养;NEC组饲养在保育箱,采用配方奶喂养+缺氧+口服脂多糖(LPS)诱导坏死性小肠结肠炎小鼠模型,建模4 d后处死所有小鼠。建模过程中记录小鼠每日体质量并观察一般情况;HE染色观察肠道组织的病理学改变。根据回盲部肠道损伤评分将NEC组分为轻度NEC组(n=12)和重度NEC组(n=12);Nissl染色观察相应脑组织的病理学变化,并将肠道损伤程度和神经细胞的数量做相关性分析。RT-qPCR检测脑组织中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白的表达水平;免疫荧光检测活化的小胶质细胞和星形胶质细胞的数量。结果与CON组相比,NEC组小鼠活动度降低,体质量明显减轻(3.84±1.25 vs 1.76±0.26 g,P<0.05),肠道损伤严重,且在海马CA1区,轻、重度NEC组的神经细胞数量减少(125.83±6.40 vs 103.83±7.93、75.50±8.87,P<0.05),重度NEC组较轻度NEC组减少更多(P<0.05);相关性分析显示:神经细胞数量与肠道损伤的严重程度呈负相关(r=-0.943,P<0.001)。与CON组相比,NEC组脑组织炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-ɑ的表达水平均升高(P<0.05),活化的小胶质细胞和星形胶质细胞也明显增多(P<0.05),并且重度NEC组较轻度NEC组升高更明显(P<0.05)。结论坏死性小肠结肠炎可导致新生小鼠发生急性脑损伤,其损伤程度与肠道损伤的严重程度相关,可能与神经炎症的增加有关。

文章关键词:坏死性小肠结肠炎,早产儿,神经炎症,脑损伤,

论文作者:王雪 邹谋 张绍卿 刘兰 杜敏 徐颖 

论文DOI: 10.16016/j.1000-5404.202103125

论文分类号: R574.62

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